Cultivo de embriones en el laboratorio de fecundación ‘in vitro’ (FIV)

El cultivo embrionario es una de las fases más importantes de los tratamientos de fecundación in vitro (FIV).

Los embriones son cultivados en el laboratorio de FIV (Fecundación in vitro) y las condiciones de éste influyen directamente en la calidad de los óvulos y los embriones.

El tiempo que permanecen los embriones en cultivo puede variar, pero lo habitual son 5 días. A partir de este momento, se procede a la transferencia embrionaria y/o vitrificación de los embriones.

A continuación tienes un índice con todos los puntos que vamos a tratar en este artículo.

¿Cuándo se realiza el cultivo embrionario?

El cultivo en el laboratorio de fecundación in vitro empieza después de obtener los óvulos mediante la punción folicular. Inicialmente, los óvulos se cultivarán sin quitar la capa de células de la granulosa que lo rodean (decumulación).

En función de la técnica de FIV aplicada para fecundar los óvulos, el siguiente paso será:

FIV convencional

se juntan los óvulos sin decumular con los espermatozoides.

ICSI

se decumulan los óvulos y se realiza la microinyección intracitoplasmática de los espermatozoides.

Punción ovárica y dia 0 de desarrollo embrionario

El cultivo de los embriones obtenidos tras la fecundación se extenderá hasta el día en que los embriones:

• Sean transferidos al útero materno, que generalmente es en día 3 o en estadio de blastocisto (día 5-6).
• Se vitrifiquen.
• Se descarten por no continuar su desarrollo o porque tengan alguna anomalía genética tras realizar el diagnóstico genético preimplantacional (DGP).

Opciones durante el cultivo embrionario

Cabe destacar que aquellos embriones sobrantes que sean vitrificados pueden tener diferentes destinos también: uso propio en el futuro, donarlos a la investigación o cederlos a otras parejas con fines reproductivo.

Etapas del desarrollo embrionario

A continuación, veremos brevemente qué estadios evalúan los embriólogos para seleccionar el embrión que tiene más probabilidades de implantar y, por tanto, dar lugar a un embarazo:

Día 1

es el día posterior a la punción folicular y es cuando se valora, 16-18h después de la fecundación, si ésta ha ocurrido correctamente. En este estadio, los embriones reciben el nombre de cigotos. Las necesidades metabólicas que tiene son muy parecidas a las de los ovocitos.

Día 2

los embriones ya han realizado las primeras divisiones y tienen 2-4 células, también conocidas con el nombre de blastómeras.

Día 3

en este momento, los embriones tienen unas 6-8 blastómeras. El embrión ya ha empezado a expresar sus propios genes, por lo que sus necesidades energéticas van cambiando gradualmente.

Día 4

el embrión se encuentra en estadio de mórula y se compacta.

Días 5 y 6

en estos días, el embrión alcanza el estadio de blastocisto. Los embriones que llegan a esta etapa con buenas características morfológicas tienen altas probabilidades de implantar.

Etapas del desarrollo embrionario

Existen varios motivos por los que los embriones se pueden detener en cualquier punto de su desarrollo embrionario. Lo más habitual es que el desarrollo embrionario se bloquee debido a la que existe alguna anomalía genética en el mismo.

¿Cómo debe ser el cultivo?

Existen variaciones en las características del cultivo embrionario entre diferentes clínicas o incluso entre pacientes.

No obstante, siempre coinciden en que las condiciones de cultivo embrionario tienen que estar perfectamente reguladas, ya que cualquier alteración puede afectar al desarrollo embrionario y comprometer las probabilidades de éxito del tratamiento de fertilidad.

Tipos de cultivos embrionarios

Dependiendo de la duración del cultivo, se distingue entre:

• Cultivo corto: hasta el día 2 o 3 de desarrollo embrionario.
• Cultivo largo: hasta el estadio de blastocisto. Puede utilizarse el mismo tipo de medio durante todo el desarrollo (medio único) o utilizar varios diferentes (medio secuencial).

¿Qué tipos de cultivos embrionarios existen?

Que se realice un tipo de cultivo u otro depende de varios factores, como la cantidad de óvulos obtenidos, la calidad de los embriones en día 3 o la necesidad de realizar un diagnóstico genético preimplantacional (DGP).

En algunos casos, también se realiza el co-cultivo, que consiste en cultivar los embriones con células endometriales para mejorar las condiciones del medio y, así, el desarrollo.

Condiciones necesarias

Los óvulos y embriones deben estar en un ambiente lo más estable posible. Para ello, se mantienen en el interior de incubadores durante la mayor parte del tiempo, ya que así las condiciones de cultivo no se alteran. Se controlan aspectos como:

• Temperatura
• Concentración de dióxido de carbono y de oxígeno
• Humedad

Condiciones necesarias para cultivar embriones en un incubador

Además, también es necesario que los laboratorios de reproducción asistida tengan unas condiciones muy controladas. Algunos de los factores que se regulan son:

• Pureza del aire (con muy pocas partículas en suspensión)
• Luz
• Temperatura
• Gases presentes y en qué porcentaje

Medios de cultivo para embriones

Los embriones se desarrollan en placas con medios de cultivo que les proporcionan los nutrientes necesarios para que evolucionen correctamente. Como ya hemos comentado, sus necesidades energéticas varían en los diferentes estadios. Dependiendo de su composición, distinguimos:

Medios secuenciales

contienen los nutrientes específicos que necesitan los embriones en determinadas etapas de su desarrollo. Suele haber un medio para los dos primeros días del desarrollo embrionario y otro para utilizar a partir del tercer día.

Medios únicos

contienen todos los nutrientes que necesita el embrión desde el día uno de desarrollo hasta el estadio de blastocisto. El embrión irá consumiendo lo que necesite en cada momento.

Preguntas de los usuarios

¿En qué pacientes se recomienda el cultivo largo?

Si fuese posible, lo ideal sería realizarlo siempre. A lo largo de 5-6 días de cultivo, vamos a valorar todos los eventos embrionarios que deben ir sucediendo (divisiones, compactación, blastulación etc.), éstos nos permiten una mejor selección embrionaria, que se traduce en una mayor tasa de implantación y embarazo. Si además a este cultivo le aplicamos la tecnología time-lapse, obtendremos más información para una selección embrionaria aún mejor.

¿Cómo puedo saber las probabilidades que tengo de que mis embriones lleguen a blastocisto?

Desde el punto de vista clínico las mujeres jóvenes y sin patología, tienen mas probabilidades de tener embriones que lleguen a blastocisto y desde el punto de vista del laboratorio aquellos embriones de buena calidad que cumplen correctamente con los tiempos de división celular y mantienen una morfología perfecta en su desarrollo temprano, también tienen mas probabilidades de llegar a blastocisto.

¿Qué significa fragmentación embrionaria?

La responsable de laboratorio y embrióloga de Ovoclinic Madrid nos cuenta en este vídeo qué es la fragmentación de los embriones. Tal y como nos dice Aurea:

La fragmentación embrionaria es un suceso que a veces vemos durante el desarrollo de los embriones. Cuando los embriones comienzan a desarrollarse, lo ideal es que una célula madre se genere dos células hijas, que el reparto de todo el material que haya en esa célula madre pase de forma equitativa a cada una de ellas. A veces ocurre que estas divisiones no son completamente limpias. No se generan dos células a partir de una, sino que se generan esas dos células y hay parte del citoplasma que se puede desprender en forma de fragmentos. Esos fragmentos son evaluados. Podemos cuantificar qué porcentaje de fragmentos hay dentro del volumen total del embrión y eso nos sirve para poder caracterizar cuál es la calidad de cada uno de los embriones. Sobre todo esto lo observamos los primeros días de desarrollo cuando el embrión se divide en células, que suele ocurrir desde el día de la fecundación, cuando se borran los signos de fecundación, hasta más o menos el día tercer o cuarto cuando empieza la compactación la unión de esas células para la formación de la mórula, que es el siguiente estadio de desarrollo.

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¿De qué forma se garantiza la trazabilidad y seguridad de las muestras en el laboratorio de FIV?

Nicolás Prados, director Global de Laboratorios FIV Clínicas Vida, nos cuenta en este vídeo cómo se lleva a cabo la trazabilidad y la seguridad de las muestras en el laboratorio de FIV:

Esto es una pregunta muy interesante. No solamente es importante la eficacia en los tratamientos de reproducción asistida, buscamos que nuestras pacientes cumplan el objetivo de tener su niño en casa, sino hay que mantener la seguridad del proceso, la seguridad en cuanto a la salud (que no enfermen ni el niño ni la madre) y que durante todo el proceso podamos ofrecer todas las garantías de que las muestras no se han confundido, no se han perdido y saber qué se ha hecho, en qué momento y quién lo ha hecho.

En las clínicas Vida utilizamos un sistema de trazabilidad electrónico que nos permite hacer esto de una forma muy muy fiable, en el que usamos un sistema de códigos de barras. Todas las placas, los tubos, todas las muestras están rotuladas, incluso las pajuelas en la que los embriones, los ovocitos y el semen están congelados. Y de esa manera vamos chequeando, comprobando que todo es siempre de la misma paciente y que las placas son las que tienen que ser.

Además, hay un sistema de doble testigo usando la app, el DNI y pulseras para identificar a las personas, tanto en la entrada del proceso, cuando se dejan las muestras, como en la inseminación artificial o la transferencia de los embriones a la paciente. También este sistema permite tenerlo todo fotografiado y se nos permite dar a los pacientes un informe completo de todos los pasos, qué medios se han utilizado, en qué momento, por quién, con sus fotografías y con todos los pasos, lo cual otorga además un plus de confianza y tranquilidad que se está haciendo todo de la mejor manera posible.

¿Qué es mejor, el cultivo corto o el largo?

Depende de cada caso, ya que cada tipo de cultivo ofrece una serie de ventajas e inconvenientes. Por una parte, es más fácil llevar a cabo el cultivo corto y, si no se dispone de muchos embriones, es más probable que llegue alguno al día de la transferencia.

Por otra parte, mediante el cultivo largo podemos seleccionar mejor cuál es el embrión con más probabilidades de implantar, ya que solamente los que son de buena calidad llegan a este estadio.

Por tanto, a cada paciente le interesará más un cultivo u otro dependiendo de las características de su caso.

¿En todos los laboratorios se tienen las mismas condiciones?

No, ya que los parámetros que le van mejor a una clínica pueden no ser los que le van mejor a otra. Por ejemplo, en algunos laboratorios obtienen mejores resultados utilizando bajas concentraciones de oxígeno en los incubadores, mientras que otros no ven diferencias significativas.

¿Los óvulos se cultivan igual que los embriones?

Existen algunas diferencias en la composición de los medios de cultivo que se utilizan en unos y en otros, pero en general las condiciones son muy similares.

A pesar de que ambos son muy delicados, los óvulos son extremadamente sensibles a los cambios de temperatura, por lo que hay que evitar de una manera especial los cambios bruscos al manipularlos desde el momento de la punción folicular.

¿Tiene buenos resultados transferir embriones en día 2 de desarrollo?

Aunque en día 2 del desarrollo podemos conseguir embarazo transfiriendo esos embriones, es cierto que los embriones a medida que evolucionan van a tener mayores probabilidades de éxito, siendo lo óptimo transferir embriones en fase de blastocisto. Transferir embriones más evolucionados tiene varias ventajas. Por un lado, es lo más fisiológico, ya que en un embarazo natural el embrión llega hasta el útero cuando está en esa fase de blasto. Además, el hecho de esperar más días hasta la transferencia nos va a permitir hacer una selección natural de los embriones que se van a ir perdiendo a lo largo del ciclo. Todo ello hace que las probabilidades de éxito por transferencia aumenten cuando mayor sea la evolución de ese embrión.
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¿Qué consecuencias tienen los embriones que evolucionan lentos?

Marta Barranquero, embrióloga en Reproducción Asistida ORG, nos cuenta en este vídeo qué sucede si los embriones evolucionan lentamente:

Un desarrollo embrionario lento es un fenómeno que se puede observar durante el cultivo embrionario en un tratamiento de fecundación in vitro (FIV). Cuando un embrión evoluciona lentamente quiere decir que la cantidad de células que contiene ese embrión es inferior al que correspondería para ese momento del desarrollo.

Por ello, una de las posibles consecuencias que podría conllevar una evolución embrionaria lenta sería la cancelación de la transferencia por bloqueo embrionario.

Sin embargo, también puede suceder que el desarrollo embrionario recupere el ritmo de división y, finalmente, sea un embrión apto para transferir.

Por tanto, es necesario esperar para analizar la evolución embrionaria, aunque entiendo que son días de mucha angustia e incertidumbre. Tienes mucha más información y consejos útiles para tu FIP en nuestra guía gratuita Fertilidad con Cabeza.

Lectura recomendada

El cultivo nos permite evaluar la evolución de los embriones, que es un aspecto clave a la hora de conseguir el embarazo mediante un tratamiento de FIV. Por ejemplo, ¿sabías que la valoración de los cigotos (día 1 de desarrollo) es fundamental para descartar algunos embriones con carga cromosómica anormal? Puedes encontrar más información sobre este tema en el siguiente enlace: Clasificación de los embriones según su calidad.

En los últimos años, ha habido una mejora muy importante en el campo de la valoración embrionaria gracias a la aplicación de la tecnología time-lapse en el cultivo. Nos permite visualizar el desarrollo embrionario continuamente y sin alterar las condiciones de cultivo, proporcionando mucha información nueva. Si quieres leer más sobre esta técnica, te recomendamos que leas este artículo: ¿Qué es el 'time-lapse'?

A pesar de este avance, no todos los embriones son capaces de llegar al estadio de blastocisto. Por eso, decidir si se realiza la transferencia en día 3 o en estadio de blastocisto sigue siendo un tema controvertido. Puedes saber más sobre las ventajas e inconvenientes de cada una de estas opciones en el siguiente enlace: ¿Transferencia de embriones en día 3 o en día 5?

Bibliografía